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ELISA試劑盒操作技巧以及操作步驟

2024-08-08 [1860]

想要得出正確結論我們就必須嚴格按照要求來進行實驗操作,尤其是相關注意事項。接下來為大家說一下ELISA試劑盒操作注意事項。

ELISA試劑盒操作技巧:

1.操作前應對試驗的物理參數有充分的了解,如環境溫度(保持在18 C~25℃)、反響孵育溫度和孵育時刻、洗刷的次數等,要先檢查水育箱溫度,ELISA試劑盒是否符合要求。

2.正確運用加樣器加樣器應垂直加入標本或試劑,避免刮擦包被板底部。加樣過程中避免液體外濺,血清殘留在反響孔壁上,加樣器吸頭要清洗潔凈,避免污染,加樣次序要與說明書共同,否則可導致成果錯誤,試驗重復性差。

3.手工洗板加洗液時沖擊力不要太大,洗刷次數不要超越說明書引薦的洗刷次數,洗液在反響孑L內停留的時刻不宜太長。不要使洗液在孑L間竄流,形成孔問污染,導致假陰性或假陽性。

4.要確保加液量共同 咱們在運用時感覺滴瓶加液不如加樣器好,滴瓶不易控制加液量禁絕,形成顯色不統一,判別錯誤。

5.顯色液量不可過多 加樣的工作環境不能處于陽光直射的環境下,加顯色系統后要避光反響,顯色液量不能過多,以免顯色過強。

ELISA試劑盒實驗操作步驟:

1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。

3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。

4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請*后乘以總稀釋倍數(×n×5)。

5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物請避光保存。

7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

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